
六聚组氨酸融合蛋白纯化方法研究
问:什么是六聚组氨酸融合蛋白?
答:六聚组氨酸(Hexa-histidine,His6)标签是一种常用的蛋白表达与纯化技术。通过将His6标签连接在目的蛋白N或C端,在细胞内或外表达后,可使用含有镍离子配体(例如Ni-NTA琼脂糖)的亲和柱进行快速、高效地纯化。
问:为什么要对六聚组氨酸融合蛋白进行纯化?
答:许多生物医学领域的研究需要分离和提取单个特定的大量重复产生的结构相同且杂质少的目标分子。因此,选择适当有效并能快速精确识别目标分子标记方式来帮助其在混杂体系中被远程检测出而变得尤为重要。
问:现今存在哪些已知方法用于六聚组氨酸基团与其他补码结合介导静电吸附?
答:其中包括了传统层数比较低但是快速,高通量的Ni-NTA亲和柱方法。还有具有更好稳定性的经特殊表面修饰后的非天然氨基酸侧链配体衍生物树脂NTA-Ni4chelatingSepharoseFF和TALON系列新型纯化树脂。