Q:如何提取土壤中的蛋白质?
A:从土壤中提取蛋白质是一项非常具有挑战性的任务。因为土壤中含有大量的杂质和微生物,这些都会对蛋白质的分离和纯化造成困难。下面介绍几种比较常见有效的土壤蛋白提取方法。
1.直接法:
将土样与适当量(比重悬浮液)缓冲液混合后,在室温下鼓磨30分钟左右,再用低速离心沉淀,去除上清液,并加入相应数量的洗涤缓冲溶剂进行洗涤后离心收集。
2.酸碱法:
在此方法中,使用酸或碱处理来改变土壤样品pH值以及电荷状态来实现目标分子组分(例如是蛋白物)。可以通过硫酸或其他强酸溶解试剂,在短时间内降低p
H值并离解不需要成份。
3.超声波法:
利用超声波作用于水体表面形成空化小气泡,在其周围产生极端高压差使得气泡剧烈膨胀和收缩,产生微弱的水流及其它作用,此种手段可有效分散固体颗粒并使之更易溶解。超声波法提取时需要先对土壤样品进行研磨,并将样品与某些试剂混合后置于超声振荡器中处理。
4.水浸法: