在生物医学实验中,研究人员需要纯化抗原以便于进一步分析和研究。然而,在纯化过程中,我们如何确定纯度已经达到了理想水平呢?有些人认为可以通过测量OD280来鉴定抗原的纯度。但是一般情况下,专业性较高的实验室不会使用这种方法。
那么,为什么不能使用OD值来判断酪蛋白等抗原的纯度呢?
OD值只能反映溶液中蛋白质含量的相对浓度,并不能准确地反映出目标蛋白质所占比例。因此,在其它成分与目标蛋白质之间存在交叉反应时(例如小分子和其他重大污染),OD值就无法有效检测数据并失去了可靠性;
在用某种离心管或色谱进行组件提取和净化后,殘留氧吸收及背景杂音会产生干扰信号影响结果的精确度。
最后一个也是非常重要且容易被忽视的问题就是:随着溶液变得越来越清澈,具体数值常常变得没有意义。在开展更感性的工作中,薄透过率通常会提供一些有价值的信息,但是和OD280这种方法相比并不那么严格。